一、毛发检测服务背景分析
为严肃党纪政务,加强党风政风建设,认真落实上级关于加大公职人员涉毒排查处理力度的工作要求,净化公职人员队伍,维护公职人员良好形象,进一步提高禁毒、防毒、拒毒意识,有效防范、发现、查处国家公职人员涉毒违法犯罪问题,进一步纯洁国家公职人员队伍,根据禁毒**的统一安排,可对当地公职人员进行毛发检验。据此要求,各级部门已经有计划的开展毛发检验服务。我公司可协助单位对相关人员进行大规模毛发初筛服务。
为切实推进全县禁毒工作,进一步纯洁我县在编在职、聘用人员队伍,防止出现干部职工参与吸毒、贩毒、等情况,树立干部职工队伍良好的形象,结合创建“无毒单位”活动,特制定本方案。
1.1指导思想
贯彻落实县委县**对禁毒工作的部署,通过深入开展在编在职、聘用人员吸毒检测工作,动员全社会的力量共同参与禁毒工作。集社会之力,聚万众之心,坚持不懈,彻底根除毒害,逐步形成全民参与、部门齐抓共管的禁毒工作大格局。
1.2工作目标
防范我县干部职工吸毒问题的发生,提高干部职工禁毒、防毒、拒毒意识,进一步纯洁在编在职、聘用人员队伍,树立我县干部职工队伍良好的形象。公职人员做好带头**作用,动员广大人民群众积极参与到禁毒工作中来,营造全社会人人参与禁毒的良好社会氛围。
1.3检测范围
全县各机关事业单位在编在职、聘用人员。
在禁毒戒毒实践中,唾液、尿液等样品是检测中较常规的样品类型。由于吸食后的中间代谢物在体液中存在的周期较短,例如,唾液中一般为24小时,尿液一般为48小时、血液一般为24小时,代谢产物的变异,以及定性检测方法的灵敏性等技术环节的限制,使社会上一些滥用者通过选择性临时停吸的方法进行规避,逃避打击。
而毛发作为一个法定的生物检测样本具有不可比拟的优势。毛发毛囊周围是有着密集的毛细血管,存在于血液中的或药物在毛发的生长过程中,从血液中进入到头皮的毛囊中,并被毛发中的角质蛋白固定,大约3-5天的时间含有药物的毛发会长出头皮表面。毛发以相对不变的速度往外生长,根据这个机制可以推测有关药物滥用的种类、时间和剂量等情况,这就是“痕量”检测的意义所在。
毛发痕量检测技术还具有*特优势包括,检出时限长、或物滥用信息全面,样本抗腐败、易采集、易保存、可重复取样等。其中,时限长是较**的优点,根据毛发长度可反映几周至数月的用药情况,较长可达3~6个月的吸毒史,与尿液检测技术相结合,可以比较全面地评价被检者滥用药物的情况,满足禁毒戒毒工作的需求。
为了解决当前禁毒民警对吸戒毒人员进行尿液、唾液检测手段存在的种种弊端,精准服务禁毒实战、用于实战、贴近实战工作需要,2018年9月31日部印发了*938号《涉毒人员毛发样本规范》,提出对于涉毒人员毛发样本的提取、保存、送检和检测要求。规范的*九条明确规定:毛发样本中O6-单乙酰、、甲基、、3,4-亚甲二氧基(MDA)、3,4-亚甲二氧基甲基(MDMA)、、去甲、甲的检测含量阈值为0.2纳克/毫克;的检测含量阈值为0.5纳克/毫克;苯甲酰爱康宁和的检测含量阈值为0.05纳克/毫克。实际检测含量值在阈值以上的,认定检测结果为。
目前,市面上常见的检测主流方法大体分为两大类:
色谱法包括气相色谱法、液相色谱法、薄层色谱法等。
其优点主要是特异性高,灵敏度高;缺点在于无法实现检测,检验时间约2小时,操作复杂,操作步骤多,无法实现现场检测,检测需要大型仪器,对检测人员要求高,需要专业人士操作。
*法主要包括酶联*吸附分析法、胶体金法、时间分辨荧光分析法等。
(1)酶联*吸附分析法
酶联*吸附分析法简称ELISA法,其主要优点是特异性高;缺点在于检测所需时间长,约2小时,操作复杂,操作步骤多,很难实现现场检测,检测过程中需要多种仪器(加热板、温浴器、检测仪等)。
(2)*胶体金分析法
*胶体金分析法运用各类偶联物与其竞争结合单克隆抗体的原理,定性检测样本中所含。但由于毛发样本中所含被角质蛋白固定,不利于的析出,需要借助毛发研磨前处理仪对毛发样本进行研磨,方能使用胶体金毛发检测试剂进行检测。
胶体金毛发技术具有方便快捷、特异敏感、稳定性强、不需要特殊设备和试剂、并免去剪碎头发,具有结果判断直观等优点, 特别适合于广大基层检验人员以及大批量检测和大面积普查等。
操作简便:毛发研磨前处理仪一键化操作,研磨完毕滴液,三十秒内即可判读结果,简单。
检测:3分钟内即可快速完成单个毛发样本中所含的定性(包含样本前处理);处理多样本时,1小时可完成100人次的定性检测。
定性准确:毛发经研磨后析出率高达85%以上,使胶体金定性更为准确。
样本高通量处理:毛发研磨前处理仪可配备多种规格适配器,可对多个毛发样本同时进行研磨。
判读简单:*特殊设备和试剂,肉眼可直接判读结果。
缺点:灵敏度低,较低检出限为1.0ng/mg,检测范围窄,有一定的假阴性。
(3)时间分辨荧光分析法
时间分辨荧光分析法(TRFIA)是在荧光分析(FIA)的基础上发展起来的,它是一种特殊的荧光分析。它用镧系元素标记抗原或抗体,根据镧系元素螯合物的发光特点,用时间分辨技术测量荧光,同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨,可有效地排除非特异荧光的干扰,较大地提高了分析灵敏度。
荧光分析利用了荧光的波长与其激发波长的巨大差异克服了普通紫外-可见分光分析法中杂色光的影响,同时,荧光分析与普通分光不同,光电接受器与激发光不在同一直线上,激发光不能直接到达光电接受器,从而大幅度地提高了光学分析的灵敏度。但是,当进行**微量分析的时候,激发光的杂的影响就显得严重了。因此,解决激发光的杂的影响成了提高灵敏度的瓶颈。
解决杂影响的较好方法当然是测量时没有激发光的存在。但普通的荧光标志物荧光寿命非常短,激发光消失,荧光也消失。不过有非常少的稀土金属(Eu、Tb、Sm、Dy)的荧光寿命较长,可达1~2ms,能够满足测量要求,因此而产生了时间分辨荧光分析法,即使用长效荧光标记物,在关闭激发光后再测定荧光强度的分析方法。
此种方法缺点:需要**机器读数;样本需要一定的孵化时间;部分荧光受相似干扰物影响。
综合以上,胶体金和荧光分析法可以作为毛发快速检验的技术基础,用于毛发检验服务。
二、毛发检验服务方案介绍
目前毛发现场快速检验主要使用的方法是胶体金法和荧光*法。其中胶体金技术具有方便快捷、特异敏感、稳定性强、不需要特殊设备和试剂、并免去剪碎头发,具有结果判断直观等优点, 特别适合于广大基层检验人员以及大批量检测和大面积普查等。荧光分析法具有定量检测-----10分钟内完成检测、灵敏度高------较低检出限为0.2ng/mg等优势。两者结合,时效更快,精准度更高,不需要剪碎毛发,每次可同时操作24人份测试板,适合任务量大,精准度高,可出测试数值。
首先利用胶体金法进行定性,得出。如有需要,再利用荧光分析进行精准定量检测或结果验证。两者结合,时效更快,精准度更高,定性定量检测,结果更具说服力。
(1)准确,检验原理上同时使用胶体金法和荧光分析法,两种方法共同定标,先定性,后定量,更准确,综合准确率可达99%以上。
(2)快速,特别对于阴性样本,只需要胶体金定性,一分钟便知道结果;加上定量总计7分钟之内可以得到结果,平均每个样本时间在2-3分钟,在国内速度较。
(3)简单,利用毛发研磨仪,解决了头发难处理的痛点,操作更简单方便,研磨后毛发中析出更充分。
(4)节约成本,胶体金法成本更低,定性分析,排除阴性样本,这样总的检验成本(时间和金钱方面)更低。
对各公职人员单位,按照工作安排进行有计划的毛发工作,采集前通知单位按照我方要求的格式做好人员花名册,约定好采集的时间和地点。
(1)提取样本工具:平剪、牙剪、一次性手套、一次性口罩、酒精、抽纸、铝箔纸、毛发信封袋、签字笔、花名册、。
(2)填写样本信息:每人领取一份毛发样本信封袋,在样本袋上填好自己的姓名、性别、年龄、身份证号、所属单位等信息。
(3)毛发样本提取:样本人员填好样本信息后到毛发处排队,依次就坐,由采集人员进行毛发采集,同时使用对采集过程进行拍照留存。
(4)样本采集及保存规范:
A提取毛发的部位:提取毛发样本时,提取人员应当佩戴一次性手套,使用剪紧贴被提取人员头皮表面剪取头**后部(如头**后部无法提取到足够头发的,可选择离该部位较近的头部部位)长度为3厘米以内的头发;长于3厘米的头发,需从发根端截取3厘米。
B提取的毛发样本量:不少于50毫克,用作检验与留存。
C采集工具消毒:提取不同人员毛发的,应及时清理采样过程中提取器材上的残留物并进行酒精消毒擦干,确保样本不被交叉污染。
D毛发样本的保存:用铝箔纸包裹装入毛发样本信封袋,统一编号。毛发样本袋应当置于室温、避光、干燥、通风、洁净的环境中,不得和缴获的在同一房间内,疑似有传染性疾病等危险性的样本应按照相关规定保存。
2.2.1胶体金定性检测
(1)打印标签
将毛发样本袋上的样本信息与单位花名册的信息进行核对并对毛发样本袋进行统一编号,然后根据毛发样本袋的编号,利用条码打印机打印编号标签2套,标签格式如:“200628-1,200628-2,200628-3......200628-700”。
(2)贴签、夹放毛发、工具消毒擦干
将离心管贴上标签,把毛发样本袋中的毛发用镊子夹入相应编号的离心管中,拧紧管盖。
(3)将夹入毛发的离心管分组放入毛发研磨仪中同时进行研磨,设置3挡5分钟。在样本研磨的时候,将相应数量的试剂板取出,贴上标签。
(4)研磨完毕将离心管取出,滴入缓冲液(滴2cm左右,大约离心管容积的一半),拧紧管盖,摇晃几下,然后拧开管盖,往同一编号的胶体金试剂板上滴液(每个加液孔都滴3-4滴,观察能否正常跑板),加液后30秒左右即可进行结果判读。
阴性(-):测试区(T)和质控区(C)均出现红色条带,判定为阴性。阴性中出现T线略浅的情况(图中右侧阴性结果),此时可对该毛发样本再次测试或者用荧光法(见*五部分)进一步验证结果。
阳性(+):仅质控区(C)出现一条红色条带,判定为阳性,此时可用荧光法进一步定量分析。
无效:质控区(C)未出现红色条带,建议重做。
(5)将检测结果在电脑上登记在excel表格里。
2.2.2荧光定量检测
将胶体金出的阳性样本统一采用荧光定量检测进行确认。
(1)按照阳性样本袋的标签编号打印两套标签,贴在离心管和荧光试剂板上。
(2)将毛发按编号夹入离心管,将所有离心管全部研磨。
(3)研磨完毕,加0.5ml缓冲液至每个离心管,摇晃几下,用试管吸取离心管中溶液,按对应编号滴入荧光检测板加液孔3-4滴。
(4)滴液后即刻放入恒温孵化器中孵化5分钟。
(5)孵化完毕,将试剂板插入毛发检测仪进行检测并打印检测结果。
(6)记录结果,收集整理检测试剂卡。
2.2.3结果分析